Barwienie metodą Grama: jak się go robi i do czego służy

Zawartość

• Jak przebiega barwienie metodą Grama
• Po co to jest

Barwienie metodą Grama lub po prostu metodą Grama to szybka i prosta technika mająca na celu zróżnicowanie bakterii zgodnie z charakterystyką ich ściany komórkowej po ekspozycji na różne barwniki i roztwory.

Tym samym za pomocą barwienia metodą Grama można oprócz kształtu bakterii sprawdzić również kolor, jaki nabierają, a wynik ten jest ważny przy określaniu innych strategii identyfikacji gatunku bakterii oraz wskazaniu przez lekarza leczenia profilaktycznego. zgodnie z charakterystyką obserwowaną mikroskopowo.

Barwienie metodą Grama jest zwykle wykonywane rutynowo w laboratorium i jest częścią badania bakterioskopowego. Zrozum, czym jest bakterioskopia i jak to się robi.

Jak przebiega barwienie metodą Grama

Barwienie metodą Grama to szybka, praktyczna i niedroga metoda identyfikacji bakterii odpowiedzialnych za infekcje, przydatna dla lekarzy do wskazania profilaktyki infekcji, która może wystąpić, ponieważ znane są specyficzne cechy tych grup bakterii,

Barwienie metodą Grama odbywa się w 7 głównych etapach, jednak protokół może się różnić w zależności od laboratorium:

1. Umieścić kilka kolonii bakterii na szkiełku, dodając kroplę wody w celu ułatwienia homogenizacji kolonii;
2. Niech trochę wyschnie, a ostrze będzie mogło szybko przejść przez płomień, aby sprzyjać wysychaniu, jednak należy zwrócić uwagę na temperaturę, ponieważ jeśli temperatura jest zbyt wysoka, może nastąpić zmiana w strukturze bakterie, które mogą wpływać na wynik badania;
3. Kiedy szkiełko wyschnie, przykryj fioletowym krystalicznym barwnikiem i pozostaw na około 1 minutę;
4. Przemyć szkiełko pod strumieniem bieżącej wody i przykryć szkiełko lugolem, który ma na celu utrwalenie niebieskiego barwnika i pozostawić na 1 minutę. Oba typy bakterii mogą wchłonąć kompleks utworzony przez barwnik i lugol, zmieniając kolor na niebieski;
5. Następnie umyj szkiełko pod bieżącą wodą i nanieś 95% alkohol, pozostawiając na 30 sekund. Alkohol jest odpowiedzialny za rozpuszczenie błony lipidowej, z której powstają bakterie Gram-ujemne, a tym samym usunięcie kompleksu utworzonego między barwnikiem a lugolem, odbarwiając te bakterie. Jednak w przypadku bakterii Gram-dodatnich alkohol odwadnia ścianę komórkową bakterii Gram-dodatnich, powodując kurczenie się porów i czyniąc je nieprzepuszczalnymi;
6. Następnie ponownie umyj pod bieżącą wodą i przykryj szkiełko drugim barwnikiem, fuksyną lub safraniną i pozostaw na 30 sekund;
7. Następnie umyj szkiełko pod bieżącą wodą i pozostaw do wyschnięcia w temperaturze pokojowej.

Gdy preparat wyschnie, można nałożyć kroplę olejku imersyjnego i obserwować preparat pod mikroskopem obiektywem 100x, umożliwiając sprawdzenie obecności lub braku bakterii, drożdży i nabłonka komórki.

Po co to jest

Głównym celem barwienia metodą Grama jest różnicowanie bakterii zgodnie z charakterystyką ściany komórkowej i ogólną morfologią. Zatem, zgodnie z charakterystyką obserwowaną pod mikroskopem, bakterie można podzielić na:

• Bakterie Gram-dodatnie, które są wizualizowane na niebiesko, ponieważ nie są odbarwione przez alkohol, ponieważ mają grubszą ścianę komórkową, a ich pory zwężają się pod wpływem lugolu;
• Bakterie Gram-ujemne, które są uwidaczniane na różowo / fioletowo ze względu na odbarwienie alkoholem i zabarwienie safraniną lub fuksyna.

Po obejrzeniu bakterii pod mikroskopem możliwe jest przeprowadzenie dalszych testów w laboratorium w celu identyfikacji gatunków bakterii. Jednak poprzez Grama i skojarzenie z objawami przedmiotowymi i podmiotowymi prezentowanymi przez daną osobę, lekarz może wskazać leczenie profilaktyczne do czasu uzyskania wyników bardziej szczegółowych badań, ponieważ w ten sposób można zmniejszyć tempo namnażania się bakterii i zapobiec powikłaniom.